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凱氏定氮法
  • 發(fā)布日期:2011-12-23      瀏覽次數(shù):2050
    •                                                                                凱氏定氮法

      凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無機(jī)銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收,再以標(biāo)準(zhǔn)堿滴定,就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。

          凱氏定氮法是基于待測(cè)天然含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱時(shí),會(huì)被氧化成為二氧化碳和水,
      然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù),即為蛋白質(zhì)含量。   
      1. 有機(jī)物中的胺根在強(qiáng)熱和CuSO4,濃H2SO4 作用下,硝化生成(NH42SO4
             反應(yīng)式為:2NH2+H2S04+2H=(NH42S04 (其中CuSO4做催化劑)   
      2.在凱氏定氮器中與堿作用,通過蒸餾釋放出NH3 ,收集于H3BO3 溶液中   
             反應(yīng)式為:(NH42SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4   
                       2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O   
          3. 用已知濃度的H2SO4(或HCI)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)HCI消耗的量計(jì)算出氮的含量,然    后乘以相應(yīng)的換算因子,既得蛋白質(zhì)的含量   
             反應(yīng)式為:(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH42SO4+4H3BO3   
                       (NH42B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3
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